培养液变浑浊是什么原因(液体培养基变浑浊原因)

最近，赛业OriCell细胞交流群有很多同学在咨询细胞污染问题。提及细胞污染，还真是让每个培养细胞的新手老手唯恐避之不及呀。

害，细胞污染轻则实验结果出不来，重则祸及他人（实验室），前期投入的人力、物力、精力、财力和长期的坚守付诸东流。

常见的细胞污染类型

被细胞污染眷顾的科研emoer，看着一堆看不出来被什么污染的细胞，momo地流下了e滴眼泪......

细胞污染类型多样，我们盘点了常见的细胞污染类型，如下图：

细胞污染最直观的方式是观察形态，当培养体系出现细菌污染时，会出现培养基变浑浊，有异味，镜下观察有明显自由行动的颗粒或念珠状菌落。真菌通常倾向于聚集生长，在培养体系内形成“毛茸茸”的菌落，或丝状菌体，但一般不出现培养基变酸等现象。至于支原体污染，大部分没有任何异常情况，培养体系、细胞生长都正常，往往容易被实验员忽视，但若不及时处理，容易造成交叉污染，因此建议各实验室定期对细胞做支原体检查。

至于黑胶虫，目前关于它的本质还说法不一，根据《生物化学与生物物理进展》杂志（PIBB）2020年1期发表的《细胞培养中“黑胶虫”污染的检测及防治》文章，文中指出黑胶虫污染具有5个特征：①细胞状态差、②低倍下呈黑色点状、③高倍下做布朗运动、④培养基不浑浊、⑤与细胞数量成反比。为什么会出现黑胶虫？该怎么处理？这里留个悬念，后期再做深入介绍。

了解细胞污染的来源，可以帮助减少细胞污染发生的频率和后果的严重性。

OriCell专家的小建议

细胞培养的常规操作包括换液、传代、冻存和复苏，只要多多注意细节，提高自己的无菌意识和操作技术，掌握正确处理污染的方法，其实细胞污染是完全可以避免的，也没那么可怕。对此，OriCell专家整理了细胞污染的处理方法和预防攻略，希望大家能学以致用。

污染的处理

1. 做好与正常细胞的隔离。

2. 用大量含高浓度双抗的培养基、缓冲液冲洗。

3. 联用多种支原体清除剂。

4. 定时复检。

细胞污染后最好的处理方式是丢弃，除非是特别有价值的细胞值得“抢救”，可以试试用大浓度的双抗来杀死污染微生物。支原体污染后，可以选择支原体清除剂进行处理，但要注意的是，即使是最好的清除剂也只能清除几种或者某些类别的支原体，没有一种清除剂能够完全清除所有自然中浩如烟海的支原体。

污染的预防

1. 严格做好实验室环境管理。

2. 培养根深蒂固的无菌意识。

3. 降低对抗生素的依赖。

万事都具有两面性，抗生素也是一把双刃剑，一方面，使用抗生素能起到一定的预防污染作用，另一方面，它并不能保证百分百避免污染，而且要注意的是，使用不当可能会对细胞的生长状态有影响，甚至培养出“超级细菌”，切不可过分依赖。

应对不同细胞污染有不同的处理措施，要解决细胞污染最好的办法还是在源头上杜绝，与其亡羊补牢，不如防患于未然。另外，尽早留种冻存，以备后用。