正常家兔颈部手术实验操作顺序(家兔颈部手术的实验操作顺序是)

在微生物学和免疫学实际工作中，常常需用到动物的血液和血清，兔血和羊血是制备血琼脂平板的必需成份，豚鼠血清则是补体的主要来源，而且免疫动物后，要从动物体内获得特异性抗体，也需要对动物进行采血。为了防止血清脂类的干扰，采血一般是在清晨空腹时进行。另外为了防止溶血，所用采血用具均必须彻底干燥。

1. 小鼠、大鼠的取血法：

（1）断头取血：这是常用的一种简便取血法。用于需要较大量的血液而又不需保存动物生命的实验中。操作者左手抓取动物，使其头略向下倾，右手持剪刀剪掉头部，立即将其颈部向下，提起动物并对准已准备好的容器（内放抗凝剂）使鼠血快速滴入容器内。此法小鼠可采血0.8～1.0 mL，大鼠可采血5～8 mL。

（2）眶动脉或眶静脉取血：此法既能采取较大量的血液，又可避免断头取血中因组织的混入而导致的溶血现象。操作时将动物倒持压迫眼球，使其突出充血后，用止血钳迅速摘除眼球，眼眶内很快即流出血液，将血滴入加有抗凝剂的玻璃器皿内至不流为止。此法由于取血过程中动物未死，心脏不断跳动，取血量较断头法多，一般可取得相当于动物体重4%～5％的血液量。用毕动物即死亡，故只适用于一次性取血。

（3）眼眶后静脉丛取血：如需要中等量的血液而又要避免动物死亡时可采用此法。取内径为1.0～1.5 mm的玻璃毛细管，临用前折断成1～1.5cm长的毛细管段，浸入1％肝素溶液中，干燥后用。取血时左手抓住鼠两耳之间的颈背部皮肤以固定头部，轻轻向下压迫颈部两侧，引起头部静脉血液回流困难使眼眶静脉丛充血，右手持毛细管，将其新折断端插入眼睑与眼球之间后再轻轻向眼底部方向移动，旋转毛细管以切开静脉丛，保持毛细管水平位，血液即流出，接收入事先准备的容器中。

取血后，应立即拔出取血管，放松左手即可止血。小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采取此法取血。刺入深度小鼠为2～3 mm，可采血0.2～0.3 mL；大鼠为4～5 mm，可采血0.4～0.6 mL。实验中可根据需要，于数分钟内在同一部位反复取血。

（4）尾尖取血：此法适用于采取小量血样。取血前宜先通过适当方法使鼠尾血管充血，然后剪去尾尖，血即自尾尖流出。

（5）心脏取血：将动物仰卧固定在固定板上，左手食指在左侧第3～4肋间摸到心博处，右手持注射器，于心尖搏动最明显处刺入心室，血液由于心脏跳动的力量自动进入注射器。 也可从上腹部刺入，穿过横膈膜刺入心室取血。此法要求操作者动作迅速、轻巧，针刺部位准确，抽吸时要缓慢而稳定，否则，较大的真空会使心脏塌陷。或因暴力作用造成动物取血后死亡。如第一次没刺准，应抽出针头重刺。

2、家兔的取血法：

（1）耳静脉采血法：用手指轻弹家兔耳朵，使其充血，并用二甲苯及乙醇涂擦使耳静脉扩张隆起，以手指压住耳静脉根部。用针头刺入静脉抽血，或以刀切开边缘静脉，即有血液流出，以无菌小试管收集滴出的血液。

（2）心脏采血法：将动物固定后，剪去左前胸部之毛，在第三与第四肋骨之间，找到心脏跳动最强的部位。经碘酒和乙醇消毒后，将无菌注射器从心脏跳动最强部位刺入，如感觉针头阻力消失，或感觉针尖搏动时，稍抽注射器活塞，血液即可流出。如针头没有穿进心脏，则稍抽出针头或将针头改变方向再进行穿刺。

（3）颈动脉放血法：将家兔仰卧固定，剪去颈部之毛，用乙醚进行全身麻醉，采血局部用碘酒与乙醇消毒。沿颈正中线切开颈部皮肤，切口长约5～6 cm，将皮肤与皮下组织剥离，找出颈动脉。以钝玻棒细心地将迷走神经与颈动脉分离。将颈动脉上部结扎，下端用止血钳夹住，将颈动脉剪断，并将下部断端对准锥形瓶瓶口，放松止血钳，则血液喷于瓶中。

3、豚鼠采血法

（1）耳缘剪口采血:将耳消毒后，用锐器(刀或刀片)割破耳缘，在切口边缘涂抹20%柠檬酸钠溶液，阻止血凝，则血可自切口自动流出，进入盛器。操作时，使耳充血效果较好。此法能采血0.5 mL左右。

（2）心脏采血:取血前应探明心脏搏动最强部位，通常在胸骨左缘的正中，选心跳最明显的部位作穿刺。针头宜稍细长些，以免发生手术后穿刺孔出血，其操作手法详见兔心脏采血。因豚鼠身体较小，一般可不必将动物固定在解剖台上，而可由助手握住前后肢进行采血即可。成年豚鼠每周采血应不超过10 mL为宜。

（3）股动脉采血:将动脉仰位固定在手术台上，剪去腹股沟区的毛，麻醉后，局部用碘酒消毒。切开长约2～3 cm的皮肤，使股动脉暴露及分离。然后，用镊子提起股动脉，远端结扎，近端用止血钳夹住，在动脉中央剪一小孔，用无菌玻璃小导管或聚乙烯、聚四氟乙烯管插入，放开止血钳，血液即导管口流出。一次可采血10～20 mL。

（4）背中足静脉取血：助手固定动物，将其右或左右膝关节伸直提到术者面前。术者将动物脚背面用乙醇消毒，找出背中足静脉后，以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端，右手拿的注射针刺入静脉。拔针后立即出血，呈半球状隆起。采血后，用纱布或脱脂棉压迫止血。反复采血时，两后肢交替使用。

4．鸡翼静脉采血法：将鸡侧卧固定，掀开一翼，在翼下可见一条较粗的静脉，经消毒后，采血者左手压迫静脉向心端，使血管隆起，右手持注射器刺入静脉取血。

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